细菌形态观察实验流程及抗菌材料影响分析

# 细菌形态观察实验流程及抗菌材料影响分析
- 材料准备
  - 培养基
    - LB液体培养基
    - LB琼脂平板
  - 试剂
    - 无菌生理盐水
    - PBS缓冲液
  - 设备
    - 恒温摇床
    - 恒温培养箱
    - 超净工作台
- 菌株复苏与活化
  - 从-80℃冰箱取出冻存管
    - 37℃水浴锅快速解冻
  - 接种
    - LB液体培养基
    - 37℃摇床培养
      - 培养时间：12-16小时
      - OD₆₀₀≈0.5
  - 传代培养
    - 次数：2-3次
    - 确保菌株生长状态良好
- 制备细菌悬液
  - 调整细菌浓度
    - 目标浓度：1×10⁷ CFU·mL⁻¹
    - 通过OD₆₀₀测定
  - 充分混匀
    - 确保细菌分布均匀
- 分组处理
  - 处理组设置
    - PBS组
    - PBS + NIR组
    - AuCu气凝胶组
    - AuCu气凝胶 + NIR组
    - AuCu@CuO₂气凝胶组
    - AuCu@CuO₂气凝胶 + NIR组
  - 加入处理试剂
    - 37℃孵育
    - 孵育时间：40分钟
- 固定与脱水
  - 离心
    - 转速：3000 rpm
    - 时间：5 min
    - 去除上清
  - 固定步骤
    - 2.5%戊二醛固定
      - 温度：4℃
      - 时间：12 h
  - 脱水步骤
    - 乙醇梯度脱水
      - 10%
      - 30%
      - 50%
      - 70%
      - 90%
      - 100%
- 扫描电镜观察
  - 脱水后细菌处理
    - 重新悬浮于无水乙醇中
  - 样品处理
    - 滴加至扫描电镜样品台
    - 干燥
    - 观察细菌形态
  - 记录
    - 细菌形态图像
- 数据分析
  - 比较各组细菌形态变化
  - 评估抗菌材料对细菌细胞壁的影响
  - 分析光热协同作用对细菌形态的增强效果